ماندانا زارعی

اسفنج دریایی Halicona simulans از سواحل جزیره خارکو در خلیج فارس، با استفاده از غواصی در عمق 10-15 متری به دست آمد. بافت مزوهیل درونی اسفنج هموژنیزه شده و در محیط کشت های مختلف مانند، مارین آگار شور، مارین آگار، SDA و EA کشت داده شد. باکتری های Staphylococcus hominis DM122، Aneurinibacillus miqulanus B0270، Pseudomonas putida KT2440، Providencia rettqeri DSM 4542، Bacillus pumilus SAFR 032، Jeotqalicoccus halotolerans YKJ 101، Bacillus subtilis، Psychrobacter pacificensis P2K6 که همزیست با اسفنج فوق بودند، با استفاده از روش های غربالگری از قبیل روش فعالیت همولیتیک، روش لیپاز و روش آب گریزی سطح سلول برای تولید بیوسورفکتانت غربالگری شدند. پس از اثبات تولید بیوسورفکتانت، ویژگی های بیوسورفکتانت با استفاده از روش های CTAB آگار، روش انحلال آنتراسن، روش انهدام قطره ی روغن، روش جابجایی روغن و شاخص امولسیون تعیین گردید. در مرحله ی بعد شناسایی بیوشیمیایی و مولکولی انجام شد. برای شناسایی مولکولی از توالی یابی s rDNA16 استفاده شد. پس از تعیین توالی محصول نهایی، انجام blast و Clastal Wو استفاده از نرم افزارهای Chromas و mega 5.5 درخت فیلوژنی و فاصله ی ژنتیکی آن ها تعیین شد. پس از شناسایی مولکولی دوره ی زمانی رشد و تولید بیوسورفکتانت تعیین شد. نهایتا پایداری بیوسورفکتانت تولید شده با استفاده از روش های پایداری در رنج وسیعی از دما، pH و شوری تعیین گردید. با NaCl2?، Aneurinibacillus miqulanus B0270 با شاخص امولسیون بیش از 70?، بیشترین میزان E24 را به خود اختصاص می دهد. سویه ی Jeotqalicoccus halotolerans YKJ با شاخص امولسیون 90?، بیشترین E24 را در pH 10 دارا می باشد. سویه ی Pseudomonas putida KT2440، با شاخص امولسیون 100? بیشترین E24 را در دمای 100 درجه ی سانتیگراد را دارا می باشد. نهایتا" مشخص گردید که این بیوسورفکتانت ها از نظر ساختمانی، در دماها، غلظت های NaCl و pH های فوق العاده، فعال وپایدار باقی مانده و بنابراین به نظر می رسد که سویه های شناسایی شده در این تحقیق و بیوسورفکتانت حاصل از آنها، پتانسیل بالایی جهت مطالعات بیشتر برای استفاده در صنایع مختلف به ویژه در (MEOR) را دارا باشند.