ماندانا زارعی

زمینه:تحقیقات بسیار محدودی بر روی جداسازی و شناسایی اگزوزوم ها از موجودات دریایی انجام شده است و با توجه به بررسی های متعدد انجام شده گزارشی از استخراج انها از درشت جلبک ها به دست نیامده است. این پژوهش گامی برای شروع استخراج آنها از درشت جلبک ها می باشد. تحقیقات انجام شده مشخص کرده است که اگزوزوم ها در ارتباط بین سلولی و همچنین شیوع بیماری ها نقش مهمی دارند لذا مطالعات بیشتر در این زمینه برای مبارزه با بیماری ها ضروری به نظر می رسد. باتوجه به کاربردهای فراوان اگزوزوم ها در زمینه های مختلف تشخیصی و درمانی و کاربرد فراوان آنها در تولید واکسن ها و داروهای جدید برای بیماری های صعب العلاج، یافتن روش هایی برای تولید اقتصادی و انبوه آنها ضروری به نظر می رسد که جداسازی و شناسایی آنها در درشت جلبک های بومی خلیج فارس در راه رسیده به این هدف کمک کننده خواهد بود. هدف: استخراج و جداسازی اگزوزوم ها از درشت جلبک ها و تعیین برخی از خصوصیات آنها روش‏شناسی: جلبک قهوه ای sp. Padina از منطقه ساحلی بوشهر جمع آوری شد و اگزوزوم ها با استفاده از کیت جداسازی اگزوزوم استخراج شده و تخلیص شدند آنالیزهای میکروسکوپ الکترونی عبوری، میکروسکوپ الکترونی روبشی، سنجش نوری پویا به جهت تعیین خصوصیات مورفولوژی اگزوزوم های استخراج شده انجام گردید. آزمون سمیت سلولی، فلوسایتومتری، آزمون مهاجرت سولی، آزمون آنتی اکسیدانی و آنتی باکتریال و وسترن بلات به منظور بررسی خواص و ویژگی های آنها انجام شد. یافته‏ها: اگزوزوم های استخراج و تخلیص شده با استفاده از کیت، در تصویربرداری با میکروسکوپ های الکترونی نگاره و گزاره مورفولوژی کروی شکل با قطر حدودی 30-100 نانومتر نشان داده و اندازه ذرات توسط سنجش نوری پویا توزیع اندازه حدودی 1-150 نانومتری نشان دادند. آنالیز وسترن بلات بیان دو نشانگر ویژه اگزوزومی CD9 وHSP70 که در سطح اگزوزوم ها در 24 و 70 کیلودالتون بیان می شود را در اگزوزوم ها تأیید کرد. اگزوزوم ها کاملاً فعالیت سلول های سرطانی تخمدان (A549) و ریه (OVCAR3) را در غلظت 75 میکروگرم بر میلی لیتر مهار کرده؛ ولی برابر سرطان سینه (MCF7) اثر مهاری نداشتند. در نتایج تست مهاجرت سلولی مشاهده گردید که اگزوزوم ها با غلظت 75 میکروگرم بر میلی لیتر متاستاز سلول های OVCAR3 را کاملاً متوقف می کنند. اگزوزوم ها در غلظت 100 میکروگرم بر