ماندانا زارعی

زمینه: آنزیم آلژینات لیاز کاربردهای قابل توجهی در صنایع مختلف از جمله پزشکی و دارو سازی دارد و تاکنون تحقیقات اندکی در مورد باکتری های بومی خلیج فارس با توانایی تولید این آنزیم انجام شده است. هدف: استخراج و خالص سازی نسبی آنزیم آلژینات لیاز از باکتری بومی خلیج فارس. روش‏ شناسی: هدف از این پروژه استخراج آنزیم آلژینات لیاز از باکتری بومی خلیج فارس و تعیین برخی خصوصیات آن بود. که در این تحقیق بعد از انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز و تعیین توالی سه سویه با توانایی تولید آنزیم آلژینات لیاز جداسازی و شناسایی گردیدند. در این پژوهش آنزیم آلژینات لیاز با کمک رسوب آمونیوم سولفات و کیسه دیالیز خالص سازی نسبی شد و با کمک الکتروفورز SDS_PAGE وزن مولکولی آنزیم به دست آمد. غلظت پروتئین آنزیم آلژینات لیاز تولید شده در این پژوهش با استفاده از روش برادفورد به دست آمد و میزان فعالیت آنزیم در حضور ترکیبات شیمیایی و یون های مختلف مورد بررسی قرار گرفت. یافته‏ ها: در این تحقیق بعد انجام پی سی آر و تعیین توالی، سه سویه pseudomonas koreensis strain JCR-18 و Lelliottia amnigena strain NCTC12124 و Bacterium fjat-scr-2 با توانایی تولید آنزیم آلژینات لیاز جداسازی و شناسایی گردیدند. که در بین آن ها سویه pseudomonas koreensis strain JCR_18 به دلیل بیشترین میزان تولید آنزیم آلژینات لیاز در محیط مایع برای بررسی و مطالعات بیشتر انتخاب شد. وزن مولکولی آن حدود 60 کیلو دالتون به دست آمد. حداکثر فعالیت آنزیم در pH=7 و درجه حرارت 30 درجه سانتی گراد به دست آمد و این آنزیم به مدت 90 دقیقه در محدوده pH (5/5-9) پایدار بود. همچنین غلظت پروتئین آنزیم آلژینات لیاز تولید شده در این پژوهش با استفاده از روش برادفورد، 88/0 میلی گرم در میلی لیتر به دست آمد. یون منیزیم و کلسیم سبب تحریک فعالیت آنزیم آلژینات لیاز می شوند و همینطور آلومینیوم و آهن می توانند فعالیت آنزیم را مهار کنند و میزان فعالیت آنزیم در حضور ترکیبات شیمیایی نیز مورد بررسی قرار گرفت که نتایج نشان داد تریتون x100 و توئین 20 و توئین 80 هر کدام به ترتیب به میزان 26، 20 و 12 درصد فعالیت آنزیم را تحریک می کنند. نتیجه‏ گیری: در این پژوهش سه باکتری pseudomonas koreensis strain JCR-18 و Lelliottia amnigena strain NCTC12124 و Bacterium fjat-scr-2 با توانایی سنت