|
Title
|
امكان سنجي جدا سازي پروموتر بتا اكتين از ميگوي ببري سبز
|
|
Type
|
Thesis
|
|
Keywords
|
Penaeus semisulcatus, beta actin, Promoter
|
|
Abstract
|
توليد موجودات با ويژگي هاي برتر هميشه جزء اهداف بشر بوده است. يكي از راه هاي دست يابي به اين هدف بيوتكنولوژي است. بيوتكنولوژي از طريق توليد موجوداتي با رشد بيش تر، مقائم تر به شرايط حاد و عوامل بيماري زا زمينه نيل به اين هدف را مهيا مي كند و كشورهاي بياني يكي از كليدي ترين ابزار در جهت توليد موجودات تراريخت است و مهم ترين جزء اين ابزار پروموتر بكاررفته در آن است. پروموتر است كه مشخص مي كند چه زمان با چه قدرتي آنزيم RNA پليمراز به DNA متصل شود. در حوزه آبزي پروري بيش ترين توجه به سمت پروموترهاي ويروسي و پستانداري معطوف شده بود اما با گذشت زمان و بررسي هاي بيشتر نقص اين پروموترها در حوزه ابزي پروري نمايان شد و محققين رو به پروموترهاي با ننشاء دريايي آوردند. پروموترها بتااكتين يكي از گزينه هاي مطرح در اين حيطه است. اين پروموتر سبب بيان بالاي بتااكتين از ميگوي ببر سبز با استفاده از روش هاي SemiAFLAP، RS-PCR، mRS- PCR وPCR Inverse امكان سنجي شد. DNA ژنومي با استفاده از روش هايي از قبيل CTAP، TES و Delaportaو همين طور با استفاده از كيت هاي تجاري استخراج شد. اين پژوهش نشان داد كه روش هاي RS-PCR و mRS- PCR چندان اميدوار كننده نيست. با استفاده از روش PCR Inverse قطعه اي به طول 350 جفت باز به دست آمد اما پس از آناليز توالي آن مشخص شد در پايين دست پروموتر قرار دارد. با تغييراتي در روش SemiAFLAP قطعه طويل تري حاصل شد كه حدود 500 جفت باز داشت. در اين روش ابتدا DNA ژنومي با استفاده از سه آنزيم B، H و S مورد هضم قرار گرفت. در ادامه اداپتورهاي اين سه آنزيم به جايگاه هاي مربوطه متصل شدند. در PCR دور اول روي ژل آگارز باند واضحي در محدوده 500 جفت بازي مشاهده گرديد. اين نتيجه با استفاده از PCRآشيانه اي تأييد شد. توالي هاي بدست آمده از سه نمونه تعيين توالي شدند و با استفاده از نرم افزار بلاست همولوژي آن ها بررسي گرديد كه نتايج بلاست نمونه ها نشان داد كه دو توالي با پرومتر بتااكتين L.vannamei همولوژي دارند.
|
|
Researchers
|
Seyed Javad Hosseini (Primary advisor) , Mandana Zarei (Advisor)
|