|
Title
|
استخراج هموگلوبين با توان بالاي اكسيژن رساني از منشا پرتاران با كاربرد درماني و استفاده در صنعت داروسازي و غذايي
|
|
Type
|
FinishedProject
|
|
Keywords
|
Not Record
|
|
Abstract
|
كشف ماده اي كه بتواند كار انتقال اكسيژن را به جاي خون انجام دهد همواره يكي از اهداف مورد توجه در حوزه ي درمان بوده است. اخيرا هموگلوبين خارج سلولي كه از كرم هاي پرتار به دست مي آيد به دليل قابليت بالاي اكسيژن رساني مورد توجه قرار گرفته اند. هموگلوبين خارج سلولي از قابليت خوبي براي ذخيره سازي برخوردار است و به دليل فقدان گليكوزيلاسيون واكنش ايمني قابل توجهي ايجاد نمي كند. هم اكنون از هموگلوبين خارج سلولي شش محصول مختلف از جمله ®HEMO2life و ®HEMOXCell توليد مي شود كه به ترتيب در حفظ اعضاي بدن پيش از پيوند و افزايش توليد پروتئين هاي نوتركيب دارويي به واسطه ي افزايش سطح اكسيژن رساني به سلول هاي در حال رشد كاربرد دارد. با توجه به اين مساله ارائه روش هاي مقرون به صرفه جهت خالص سازي هموگلوبين خارج سلولي از پرتاران ضروري است. با توجه به ظرفيت استان بوشهر به عنوان زيستگاه پرتاراني از جنسPrinereis و امكان پرورش اين پرتاران در كشور، هدف از انجام طرح حاضر ارائه روشي آسان و مقرون به صرفه جهت خالص سازي هموگلوبين خارج سلولي از كرم هاي پرتار بومي استان بوشهر به عنوان محصولي با ارزش تجاري و ارزيابي كارايي آن بر رشد سلول هاي مهم در صنعت داروهي نوتركيب است. به اين منظور كرم هاي پرتار از سواحل منطقه بندرگاه بوشهر جمع آوري شد و پس از شناسايي مولكولي، كار خالص سازي هموگلوبين با روش كروماتوگرافي رزين نيكل (Ni-NTA) انجام شد. حضور و خلوص هموگلوبين در محلول خالص شده به ترتيب با ميكروسكوپ الكتروني TEM و الكتروفورز SDS-PAGE بررسي شد. عملكرد هموگلوبين تخليص شده بر رشد سلول هاي مهم در صنعت توليد داروي نوتركيب از جمله CHO-K1 با شمارش سلولي با لام نئوبار، ارزيابي اثرات جانبي احتمالي با انجام تست كلني زايي و آناليز چرخه سلولي و مرگ سلولي با فلوسايتومتري انجام شد. همچنين اثرات جانبي احتمالي هموگلوبين خالص شده با روش كروماتوگرافي Ni-NTA با اندازه گيري وزن و سلامت عمومي موش هاي BALB/c در طي 12 هفته پس از تزريق مورد مطالعه قرار گرفت. مطالعه مولكولي نشان داد كه كرم هاي جمع آوري شده متعلق به جنس Prinereis مي باشند. نتايج ميكروسكوپ الكتروني و SDS-PAGE حضور و خلوص هموگلوبين خارج سلولي به دست آمده از روش كروماتوگرافي Ni-NTA را تاييد كرد. همچنين مشاهده شد كه هموگلوبين خالص شده از روش كروماتوگرافي Ni-NTA به ط
|
|
Researchers
|
Amirhossein Ahmadi (First researcher) , Seyed Javad Hosseini (Co worker) , ُAhmad qasemei (Co worker) , Ahmad Shadi (Co worker) , sakine avizhgan (Co worker)
|