|
Title
|
شناسايي و جداسازي ژن آنزيم delta 5 Desaturaseاز ريزجلبك Isochrysis sp
|
|
Type
|
Thesis
|
|
Keywords
|
ايزوكرايسيس گالوانا ، اسيد چرب امگا 3 ، اسيد چرب بلند زنجير غير اشباع ، دلتا 5 دساچوراز ، ريزجلبك ، ايكوزاپنتانوئيك اسيد
|
|
Abstract
|
اسيدهاي چرب غيراشباع بلند زنجير امگا 3مانند ايكوزاپنتانوئيك اسيد (EPA) نقش مهمي را در سلامتي انسان ، دام و آبزيان ايفا مي كنند. از جمله منابع خوب توليد كننده اسيدهاي چرب غيراشباع ريزجلبك ها مي باشند كه داراي مسيرهاي منحصر به فرد براي توليد دوكوزاهگزانوييك اسيد (DHA ) و ايكوزاپنتانوئيك اسيد هستند . ريزجلبك Isochrysis يكي از منابع ريزجلبكي، داراي ميزان بالايي اسيد هاي چرب بلند زنجير غير اشباع است. در مسير متابوليسمي توليد اسيدهاي چرب غيراشباع بلند زنجير امگا 3و امگا 6، آنزيم دلتا 5 دساچوراز در تبديل پيش سازهاي اوليه آلفالينولئيك اسيد و لينولئيك اسيد به اسيدچرب بلند زنجير غيراشباع امگا 3 ايكوزاپنتانوئيك اسيد و اسيدچرب بلند زنجير غيراشباع امگا6 آراشيدونيك اسيد نقش دارد. در اين تحقيق، در ريزجلبكIsochrysis galbana به شناسايي ژن آنزيم دلتا 5 دساچوراز كه مسئول توليد اسيد چرب ايكوزاپنتانوئيك اسيد و آراشيدونيك اسيد مي باشد، پرداخته شده است. از اين رو براي خالص سازي ريزجلبك مورد نظر از كشت متوالي استفاده شد تا از نبود آلودگي هاي باكتريايي و قارچي اطمينان حاصل شود. ريزجلبك خالص شده سپس با توالي يابي و BLAST ژن 18srDNA در NCBI، ريزجلبك Isochrysis galbana شناسايي شد. بعد از بهينه سازي شرايط رشد ريزجلبك (8 PH، نور در lux 1500 و شوري مربوط به gr/l 35)، RNA استخراج و cDNA سنتز شد. در مرحله بعد پرايمرهاي طراحي شده براي شناسايي ژن آنزيم دلتا 5 دساچوراز. بخشي از آن را تكثير كردند. در نهايت با توالي يابي محصول PCR و BLAST در GenBank، %99 هم ساني و 97% هم پوشاني با JQ034610.1 Isochrysis galbana داشت. توالي نوكلئيك اسيدي قطعه cDNAباكمك نرم افزار CLC Main Workbench 5.5 به توالي آمينواسيدي تبديل گرديد . تواي پپتيدي با توالي آمينو اسيدي آنزيم دلتا 5 دساچوراز در ريزجلبك هاي ديگر شامل Isochrysis galbana (AFD22890.1 و AEA72469.1) و) Rebecca salina ABL96295.1) موجود در NCBI با استفاده از clustal w2 ، هم ترازي انجام گرفت. شباهت ها و تفاوت هايي ديده شد .نتايج حاصله از هم ترازي ،سه موتيف غني از هيستيدين مربوط به آنزيم دلتا 5 دساچوراز را با توالي هاي HEGGH ،HNKHH و QLEHH و همچنين موتيف FA Desaturase نشان داد. . با توجه به . با توجه به اهميت شناسايي ژن آنزيم ها در مسير متابوليسمي اسيدهاي چرب غيراشباع
|
|
Researchers
|
Simin Nafian dehkordi (Student) , Mehdi Mohammadi (Primary advisor) , Sataar Tahmasebi (Advisor)
|