|
Title
|
جداسازي و تعيين خصوصيات اگزوزوم هاي بافت درشت جلبك قهوه اي بومي فارس خليج
|
|
Type
|
Thesis
|
|
Keywords
|
: ضد سرطان، اگزوزوم، ضد باكتريايي، آزمون Western Blot
|
|
Abstract
|
زمينه:تحقيقات بسيار محدودي بر روي جداسازي و شناسايي اگزوزوم ها از موجودات دريايي انجام شده است و با توجه به بررسي هاي متعدد انجام شده گزارشي از استخراج انها از درشت جلبك ها به دست نيامده است. اين پژوهش گامي براي شروع استخراج آنها از درشت جلبك ها مي باشد. تحقيقات انجام شده مشخص كرده است كه اگزوزوم ها در ارتباط بين سلولي و همچنين شيوع بيماري ها نقش مهمي دارند لذا مطالعات بيشتر در اين زمينه براي مبارزه با بيماري ها ضروري به نظر مي رسد.
باتوجه به كاربردهاي فراوان اگزوزوم ها در زمينه هاي مختلف تشخيصي و درماني و كاربرد فراوان آنها در توليد واكسن ها و داروهاي جديد براي بيماري هاي صعب العلاج، يافتن روش هايي براي توليد اقتصادي و انبوه آنها ضروري به نظر مي رسد كه جداسازي و شناسايي آنها در درشت جلبك هاي بومي خليج فارس در راه رسيده به اين هدف كمك كننده خواهد بود.
هدف: استخراج و جداسازي اگزوزوم ها از درشت جلبك ها و تعيين برخي از خصوصيات آنها
روششناسي: جلبك قهوه اي sp. Padina از منطقه ساحلي بوشهر جمع آوري شد و اگزوزوم ها با استفاده از كيت جداسازي اگزوزوم استخراج شده و تخليص شدند آناليزهاي ميكروسكوپ الكتروني عبوري، ميكروسكوپ الكتروني روبشي، سنجش نوري پويا به جهت تعيين خصوصيات مورفولوژي اگزوزوم هاي استخراج شده انجام گرديد. آزمون سميت سلولي، فلوسايتومتري، آزمون مهاجرت سولي، آزمون آنتي اكسيداني و آنتي باكتريال و وسترن بلات به منظور بررسي خواص و ويژگي هاي آنها انجام شد.
يافتهها: اگزوزوم هاي استخراج و تخليص شده با استفاده از كيت، در تصويربرداري با ميكروسكوپ هاي الكتروني نگاره و گزاره مورفولوژي كروي شكل با قطر حدودي 30-100 نانومتر نشان داده و اندازه ذرات توسط سنجش نوري پويا توزيع اندازه حدودي 1-150 نانومتري نشان دادند. آناليز وسترن بلات بيان دو نشانگر ويژه اگزوزومي CD9 وHSP70 كه در سطح اگزوزوم ها در 24 و 70 كيلودالتون بيان مي شود را در اگزوزوم ها تأييد كرد. اگزوزوم ها كاملاً فعاليت سلول هاي سرطاني تخمدان (A549) و ريه (OVCAR3) را در غلظت 75 ميكروگرم بر ميلي ليتر مهار كرده؛ ولي برابر سرطان سينه (MCF7) اثر مهاري نداشتند. در نتايج تست مهاجرت سلولي مشاهده گرديد كه اگزوزوم ها با غلظت 75 ميكروگرم بر ميلي ليتر متاستاز سلول هاي OVCAR3 را كاملاً متوقف مي كنند. اگزوزوم ها در غلظت 100 ميكروگرم بر
|
|
Researchers
|
motahareh mohebi fard (Student) , Mandana Zarei (Primary advisor) , Fereshteh Bayat (Primary advisor) , arezoo kharadmehr (Advisor)
|