|
Title
|
سنتز نانوذره مغناطيسي فريت كبالت پوشش داده شده با PEG و PEI و كارايي آن در خالص سازي DNA آزاد و ژنومي سلول هاي AGS در مقايسه با كيت ستوني
|
|
Type
|
Thesis
|
|
Keywords
|
نانوذرات مغناطيسي، فريت كبالت و استخراج DNA
|
|
Abstract
|
مقدمه و هدف: استخراج و خالص سازي DNA يكي از موارد مهم در پژوهش هاي زيست شناسي شناخته شده، زيرا استخراج DNA زمينه انجام آزمايش هاي پايين دستي را فراهم مي نمايد. يكي از روش هاي جديد استخراج DNA را مي توان استفاده از نانوذرات مغناطيسي يادآوري نمود. هدف از اجراي اين پژوهش نيز سنتز نانوذره مغناطيسي فريت كبالت با پوشش poly ethylene glycol (PEG) و poly ethyene imine (PEI) در استخراج DNA آزاد و ژنومي از رده سلولي adenocarcinoma gastric cell line (AGS) و مقايسه آن با كيت ستوني است. مواد و روش ها: رده سلولي AGS در آزمايشگاه كشت سلول، كشت شد. نانوذره مغناطيسي فريت كبالت توسط روش هيدروترمال از كلريت هاي آهن و كبالت سنتز و توسط پليمرهاي PEG و PEI پوشش دهي شده، سپس توسط آزمايش هاي طيف سنجي پراش اشعه ايكس، طيف سنجي فروسرخ تبديل فوريه، مغناطيس سنج نمونه ارتعاشي و بررسي ميكروسكوپ الكتروني روبشي تعيين ويژگي گرديد. بعد از بهينه سازي غلظت نانوذرات مغناطيسي فريت كبالت، غلظت مناسب نانوذره براي استخراج DNA مشخص شده، فرايند استخراج DNA با 3 تكرار براي هر نانوذره و كيت ستوني از محيط كشت (براي استخراج DNA آزاد) و رده سلولي AGS (براي استخراج DNA ژنومي) انجام شد. براي بررسي واكنش پذيري DNA استخراج شده توسط نانوذرات و كيت ستوني از آزمايش polymerase chain reaction (PCR) با استفاده از آغازگرهاي ژن اكتين و الكتروفورز ژل آگارز استفاده شد. نتايج: نتايج دريافتي از آزمايش هاي طيف سنجي پراش اشعه ايكس و طيف سنجي فروسرخ تبديل فوريه بيانگر تشكيل ساختار نانوذره فريت كبالت و پوشش دهي آن توسط پليمرهاي PEG و PEI هستند. تصاوير ميكروسكوپ الكتروني روبشي، بيانگر تشكيل ساختار كروي نانوذرات بوده، توزيع اندازه نانوذرات بيان مي دارد كه ميانگين قطر نانوذره فريت كبالت 35/42 نانومتر، نانوذره فريت كبالت با پوشش PEG 15/55 نانومتر و نانوذره فريت كبالت با پوشش PEI 76/60 نانومتر هستند. بادرنظر داشت نتايج بهينه سازي غلظت نانوذره براي استخراج DNA بهترين غلظت نانوذره براي استخراج DNA 320 ميكروگرم در ميكروليتر است. ميزان DNAژنومي استخراج شده از رده سلولي AGSتوسط نانوذره با پوشش PEI (6/15 ميكروگرم در ميلي ليتر) نسبت به نانوذره با پوشش PEG (6/19 ميكروگرم در ميلي ليتر) كمتر بوده، ولي خلوص DNAژنومي استخراج شده از رده سلولي AGS توسط
|
|
Researchers
|
morteza jafari (Student) , Amirhossein Ahmadi (Primary advisor) , Hossein Nikmanesh (Primary advisor) , ُAhmad qasemei (Advisor)
|