|
Title
|
استخراج آنزيم آلژينات لياز از باكتري بومي خليج فارس
و تعيين برخي خصوصيات آن
|
|
Type
|
Thesis
|
|
Keywords
|
جلبك قهوه اي، آنزيم آلژينات لياز، ميكروارگانيسم، خليج فارس
|
|
Abstract
|
زمينه: آنزيم آلژينات لياز كاربردهاي قابل توجهي در صنايع مختلف از جمله پزشكي و دارو سازي دارد و تاكنون تحقيقات اندكي در مورد باكتري هاي بومي خليج فارس با توانايي توليد اين آنزيم انجام شده است.
هدف: استخراج و خالص سازي نسبي آنزيم آلژينات لياز از باكتري بومي خليج فارس. روش شناسي: هدف از اين پروژه استخراج آنزيم آلژينات لياز از باكتري بومي خليج فارس و تعيين برخي خصوصيات آن بود. كه در اين تحقيق بعد از انجام واكنش زنجيره اي پليمراز و تعيين توالي سه سويه با توانايي توليد آنزيم آلژينات لياز جداسازي و شناسايي گرديدند. در اين پژوهش آنزيم آلژينات لياز با كمك رسوب آمونيوم سولفات و كيسه دياليز خالص سازي نسبي شد و با كمك الكتروفورز SDS_PAGE وزن مولكولي آنزيم به دست آمد. غلظت پروتئين آنزيم آلژينات لياز توليد شده در اين پژوهش با استفاده از روش برادفورد به دست آمد و ميزان فعاليت آنزيم در حضور تركيبات شيميايي و يون هاي مختلف مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: در اين تحقيق بعد انجام پي سي آر و تعيين توالي، سه سويه pseudomonas koreensis strain JCR-18 و Lelliottia amnigena strain NCTC12124 و Bacterium fjat-scr-2 با توانايي توليد آنزيم آلژينات لياز جداسازي و شناسايي گرديدند. كه در بين آن ها سويه pseudomonas koreensis strain JCR_18 به دليل بيشترين ميزان توليد آنزيم آلژينات لياز در محيط مايع براي بررسي و مطالعات بيشتر انتخاب شد. وزن مولكولي آن حدود 60 كيلو دالتون به دست آمد. حداكثر فعاليت آنزيم در pH=7 و درجه حرارت 30 درجه سانتي گراد به دست آمد و اين آنزيم به مدت 90 دقيقه در محدوده pH (5/5-9) پايدار بود. همچنين غلظت پروتئين آنزيم آلژينات لياز توليد شده در اين پژوهش با استفاده از روش برادفورد، 88/0 ميلي گرم در ميلي ليتر به دست آمد. يون منيزيم و كلسيم سبب تحريك فعاليت آنزيم آلژينات لياز مي شوند و همينطور آلومينيوم و آهن مي توانند فعاليت آنزيم را مهار كنند و ميزان فعاليت آنزيم در حضور تركيبات شيميايي نيز مورد بررسي قرار گرفت كه نتايج نشان داد تريتون x100 و توئين 20 و توئين 80 هر كدام به ترتيب به ميزان 26، 20 و 12 درصد فعاليت آنزيم را تحريك مي كنند.
نتيجه گيري: در اين پژوهش سه باكتري pseudomonas koreensis strain JCR-18 و Lelliottia amnigena strain NCTC12124 و Bacterium fjat-scr-2 با توانايي سنت
|
|
Researchers
|
Mandana Zarei (Primary advisor) , Sedigheh Hashemnia (Advisor)
|