Research Info

Home \جداسازی و شناسایی مولکولی ...
Title جداسازي و شناسايي مولكولي باكتري همزيست Bacillus subtilis str. 168 با توانايي توليد بيوسورفاكتانت از اسفنج هاي خليج فارس
Type Presentation
Keywords Food industry- Primer - oil displacement test
Abstract در سالهاي اخير اسفنج هاي دريايي بسيار مورد توجه قرار گرفته اند زيرا بيش از 04 % تركيبات فعال بيولوژيك كه تا كنون از موجودات دريايي جداسازي شده است، از اسفنج ها به دست آمده است. اسفنج ها ميزبان گروه بزرگي از ميكروارگانيسم ها بوده و بيش از 04 تا 04 درصد بيوماس اسفنجها را ميكروارگانيسم هاي همزيست تشكيل مي دهند. ميكروارگانيسم هاي همزيست توليد كنندگان اصلي تركيبات فعال زيستي اسفنج ها مي باشند. اين اولين بار است كه باكتري همزيست اسفنج هاي دريايي با توانايي توليد بيوسورفاكتانت در ايران جداسازي شده و مورد شناسايي مولكولي قرار گرفته است. مهم ترين ويژگي بيوسورفاكتانت ها، سازگاري زيست محيطي آنها مي باشد؛ چرا كه اين تركيبات به راحتي در طبيعت تجزيه شده و سميّت كمتري نسبت به سورفاكتانت هاي سنتزي دارند.همچنين ميكروارگانيسمهاي توليدكنندهي بيوسورفكتانت قادرند برروي سوبستراهاي ارزان قيمت مانند مواد زائد و دورريز كشاورزي رشد كرده وبيوسورفكتانت توليد نمايند. بيوسورفاكتانت ها در تصفيه زيستي خاكهاي آلوده به Polychlorinated biphenyl Phenanthren و انواع فلزات سنگين نيز كارايي بالايي از خود نشان داده اند. ابتدا بافت هموژنيزهي اسفنج Haliclona simulans كه با غواصي از اطراف جزيره خاركو به دست آمده بود، بر روي سه نوع محيط كشت ، مارين آگار، امرسون آگار) EA ( و CTAB آگار كشت داده شدند. در مرحله بعد به منظور غربالگري باكتريهاي توليد كننده بيوسورفاكتانت، سويه هاي به دست آمده در مرحله قبل بر روي محيط كشت آگار زرده تخم مرغ )تست توليد ليپاز( و آگار خوني )تست هموليتيك( كشت شدند. سويه انتخاب شده به محيط كشت مايع )توليد( منتقل گرديد وپس از 7 روز انكوبه سدن در دماي 34 درجه سانتيگراد، بيوسورفاكتانت آن استخراج گرديد. به منظور بررسي كيفيت بيوسورفاكتانت به دست آمده تستهاي مختلفي انجام شد كه ميتوان به Emulsification index, oil displacement test و تست آبگريزي سطح سلول اشاره نمود. همچنين پايداري بيورفكتانتهاي بدست آمده در pH ، دما و غلظتهاي مختلف Nacl مورد بررسي قرار گرفت. به منظور شناسايي مولكولي سويه منتخب از روش 16sr DNA استفاده گرديد. از روش CTAB براي استخراج DNA باكتري استفاده شد. توالي پرايمر هاي مورد استفاده عبارت بودند از: AGAGTTTGATCMTGGCTCAG : Forward و TACGGYTACCTTGTTACGACTT : Reverse . با استفاده از
Researchers Mandana Zarei (First researcher) , Seyed Javad Hosseini (Third researcher)