|
چکیده
|
در این مطالعه نانوذرات کاتالاز با روش حلال زدایی تهیه شدند. فاکتورهای مؤثر بر فرآیند سنتز مانند اتانول (عامل حلال زدا )، گلوتارآلدهید (عامل اتصال دهنده عرضی)، سرعت چرخش و زمان سنتز بهینه شدند. ویژگی های نانوذرات حاصل شامل اندازه ذرات، ریخت شناسی سطح و تغییرات ساختاری آن ها با استفاده از روش های مرئی – فرابنفش (UV-Visible)، پراکندگی نور دینامیکی ( DLS)، میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) و طیف سنجی مادون قرمز تبدیل فوریه ( FT-IR) تعیین شدند. هم چنین، پارامترهای سینتیکی نانوذرات براساس معادله میکائیلس – منتن تعیین شدند. نتایج حاصل از بهینه سازی شرایط سنتز نانوذرات نشان داد که نانوذرات حاصل از برهم کنش 1 میلی لیتر کاتالاز 1میلی گرم/ میلی لیتر ، 4 میلی لیتر اتانول و گلوتار آلدهید ??/?میلی گرم بر میلی لیتر در محیط بافر فسفات ?? میلی مولار و ?/7 pH ، تا ??? فعالیت آنزیمی باقی می ماند. در این شرایط شعاع متوسط نانوذرات سنتز شده 8/53 نانومتر می باشد. بررسی طیف های فرابنفش-مرئی و مادون قرمز نشان داد که تغییرات ساختاری نانوذرات در سطح ساختار سوم و دوم صورت می پذیرد. بررسی پارامترهای سینتیکی آنزیم طبیعی و نانوذره آنزیمی نشان داد که در مقایسه با آنزیم کاتالاز، ضمن افزایش Km مقدار Vmax برای نانوذره سنتز شده ثابت می ماند. پایداری فیزیکی نانوذرات کاتالاز نیز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که بعد از 72 ساعت نگهداری نمونه ها در دمای 4 درجه سانتی گراد، نانوذره کاتالاز فقط 20 درصد از فعالیت خود را از دست می دهد در صورتی که کاتالاز طبیعی در همان شرایط 55 درصد از فعالیت خود را از دست می دهد که دلالت دارد بر این که نانوذرات کاتالاز پایدارتر از مولکولهای کاتالاز هستند. بنابراین نانوذرات کاتالاز توان بالقوه زیادی در تولید آنزیم های پایدار برای کاربردهای مختلف دارند.
|