عنوان
|
جدا سازی و شناسی و کلونیگ ژن هورمون رشد ماهی هامور(Epinephelus coioides) در E. coli
|
نوع پژوهش
|
مقالات در نشریات
|
کلیدواژهها
|
هورمون رش، کلونینگ ژن، هامور معمولی (Epinephelus coioides)،وکتور
|
چکیده
|
با توجه به اهمیت ژن هورمون رشد در آبزی پروری، در این پژوهش کلونینگ ژن هورمون رشد ماهی هامور معمولی (Epinephelus coioides) در وکتور pTZ57R/T مورد بررسی قرار گرفت. پس از خالص سازی محصول PCR توسط کیت QIAquick Gel Extraction، ژن هورمون رشد در وکتور pTZ57R/T قرار گرفت. محصول اتصال به سلول های مستعد E. coli سویه DH5a انتقال گردید. از کلونی های سفید که نشان دهنده نوترکیب بودن باکتری حامل آنها بود، استخراج پلاسمید انجام شد. تایید صحت کلون های بدست آمده در این پژوهش با روش های PCR مستقیم و تعیین توالی انجام گرفت. cDNA هورمون رشد هامور معمولی دارای یک چارچوب باز خواندنی متشکل از 615 نوکلئوتید و 204 اسید آمینه است. وزن مولکولی محاسبه شده و نقطه ایزوالکتریک پیش بینی شده پروتئین هورمون رشد به ترتیب برابر با 23.014 کیلو دالتون و 6.9 است. نتایج حاصل از این مطالعه نشان می دهد که ژن هورمون رشد در وکتور pTZ57R/T با موفقیت کلون گردیده است و می توان از آن جهت بیان ژن هورمون رشد در وکتورهای بیانی و تولید پروتئین هورمون رشد استفاده کرد. مقایسه توالی ژن بدست آمده با توالی ژن هورمون رشد هامور معمولی موجود در بانک ژنی شباهت بین آنها را نشان می دهد.
|
پژوهشگران
|
فاطمه خشت زر (نفر اول)، حسین ذوالقرنین (نفر دوم)، بیتا ارچنگی (نفر سوم)، ابراهیم رجب زاده (نفر چهارم)، احمد قاسمی (نفر پنجم)
|