عنوان
|
بررسی تأثیر گابا و ملاتونین بر زیست توده و بیان برخی ژن های دخیل در مسیر بیوسنتز آستاگزانتین و اسیدهای چرب در هماتوکوکوس پلوویالیس تحت شرایط مختلف نوری
|
نوع پژوهش
|
پایاننامه
|
کلیدواژهها
|
GABA, melatonin, astaxanthin, fatty acids, Haematococcus pluvialis, different light conditions, gene expression
|
چکیده
|
: تحقیقات بی شماری در مورد مزایای بالقوه آستازاگزانتین برای انسان و حیوانات صورت گرفته و شناسایی، تولید و استفاده از منابع طبیعی آن نیز انجام شده است؛ اما بیشتر بازارهای جهانی را نوع سنتزی آن پوشش می دهد. آستازاگزانتین یک متابولیت ثانویه که در انواع سلول های پروکاریوتی به ویژه ریزجلبکها سنتز میشود. هماتوکوکوس پلوویالیس با تجمع و ذخیره آن تا 4 درصد کل زیست توده خود، از مهمترین ارگانیسم تولید کننده آن است. به علت القای سنتز راحت آستازاگزانتین در ریزجلبک هماتوکوکوس پلوویالیس، وظیفه دانستیم تا این پژوهش را با هدف سنجش مولکولی در بیان کیفی ژنهای مداخله کننده در مسیر بیوسنتزی ترکیبات ثانویه مد نظر، به انجام رسانیم. آستازاگزانتین در این ریزجلبک از طریق القای شیمیایی بیوسنتز میشود و با اضافه نمودن القاگرهای گابا و ملاتونین به محیط کشت حاوی سلول ها و قراردادن آنها تحت شرایط مختلف نوری انجام شد. در نهایت، سلولهای جلبک را بعد از عبور فاز رشد، در نه حالت متفاوت با سه تکرار، با غلظت های صفر و0001/0 گرم در لیتر در لیتر گابا و صفر و 0001/0گرم در لیتر ملاتونین و زیر تابش نور LED با سه رنگ آفتابی، آبی و قرمز با چرخه خواب بیداری 16-8 تیمار داده و رفتارهای سلول ها را در تولید از طریق سنجش میزان جذب، مورد مطالعه قرار گرفت. در این پژوهش متغییرهایی مانند دما، نور و مواد غذایی مصرفی ثابت قرار گرفت و تنش های شیمایی در مقابل آن، اعمال گردید و تولید متابولیت ثانویه از طریق اندازه گیری میزان جذب و سنجش کیفی بیان ژنهای درگیر در مسیر بیوشیمیایی سنتز آستازاگزانتین بوسیلهی تکنیک RT-PCR ، مورد بررسی قرار گرفت. هدف از انجام پژوهش، یافتن بهترین شرایط تنشی جهت بیوسنتز و تولید متابولیت ثانویه آستازاگزانتین و اسیدهای چرب بود. به جهت این منظور جامعه ای تشکیل شده از تیمارها در شرایط فیزیکی یکسان ولی تنش های شیمیایی متفاوت قرار گرفت. براین اساس، بهینه ترین شرایط با بیشترین میزان انباشت نهایی مشخص شد.
|
پژوهشگران
|
افشین جوکار (دانشجو)، احمد قاسمی (استاد راهنما)، غلامرضا عبدی (استاد راهنما)
|